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点击次数:894 发布时间:2019/11/15 14:28:35
· 上 传 者: 上海极威生物科技有限公司
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· 资料简介: HOK 人正常口腔角质细胞 Catalogue No.: C1366 Product Format: a T25 flask Culture Properties:贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY. Components Item Specifications a T25 flask 2X106 Manual 1 copy Operation steps for cell culture 1. 吸走用于培养基,加入 3-5mL PBS 后轻轻晃动培养瓶润洗细胞; 2. 吸干净 PBS 后加入 1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表 面,培养瓶放 37 度培养箱消化; (细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或 者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止 消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。) 3. 加入 6-8ml 完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀; 4. 将混匀的细胞 1000rpm(约 150g)离心 3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬 37 度培 养箱继续培养; 传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用 1:3-1:4 传代,生长较慢的细胞可以 1:2 传代。 Cell cryopreservation 1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择) 2.降温步骤:4 度 10min,-20 度 2h,-80 过夜后液氮保存。Tips: 1. 细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞si亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞 可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约 150g)离心 3min,弃上清。加 5ml PBS 重悬细胞,再 900-1000rpm(约 150g)离心 3min,用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培 养瓶。第二次 PBS 重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略 PBS 重悬的步 骤;如果碎片很多,建议 PBS 多洗几次。 2. 细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。 3. 细胞生长缓慢时,可以选择提高血清浓度培养(zui高不超过 20%),也可以根据细胞生长状态, 选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。 4. 不同细胞贴壁性差异比较大,所以消化时间差别较大,20s-10min 均有可能,具体以细胞消化到 相互分离但未脱落,并可以轻轻吹下为准,严禁消化到细胞完全漂浮。客户消化过度导致细胞死 亡、漂浮、生长缓慢,不提供免费售后服务。 5. 干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若 客户同时复苏两支均状态不佳,我方不提供免费售后服务。 6. 细胞状态正常时,应尽快冻存细胞保种,冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻 存细胞导致死亡负责,客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。 Notice: 客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们,细胞收到后 1 周内没有任何电hua,或其他形式回访, 默认为细胞质量没问题,之后出了任何问题不给予免费售后。细胞免费售后只提供一次,若重发后再 次培养死亡不再免费补发,细胞收货时已经死亡或密度不足的除外。 其他相关产品介绍: 现G&VS12050 青链霉素混合液 100毫升 现G&VS12051.1 精制胎牛血清 100/200毫升 现G&VS12051.2 新生牛血清 500毫升 现G&VS12051.3 无激素精制胎牛血清 100毫升 G&VS12110 胰蛋白酶中和液 100毫升 G&VS10069 细胞培养病毒污染溶斑法结晶紫染色试剂盒 20次 现G&VS10070 细胞培养病毒污染溶斑法中性红染色试剂盒 20次 现干G&VS10088.1 通用型细胞培养污染性支原体属鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 现干G&VS10088.2 细胞培养污染性支原体荧光染色鉴定试剂盒 20/100次 G&VS10088.3 细胞培养污染性支原体M.fermentans鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10088.4 细胞培养污染性支原体M.hyorhinis鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10088.5 细胞培养污染性支原体M.orale鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10088.6 细胞培养污染性支原体M.hominis鉴定16S rDNAPCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10088.7 细胞培养污染性支原体M.arginini鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10088.8 细胞培养污染性支原体A.laidlawii鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 20次 G&VS10089 细胞培养抗支原体污染试剂盒 10次 G&VS10107.1 细胞脂质生成比色法定量检测试剂盒 G&VS10107.2 地塞米松细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒 20次 G&VS10107.3 异丁甲基黄嘌呤细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒 20次
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