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细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒抑制剂筛选

点击次数:881   发布时间:2021/6/24 18:03:24

细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒抑制剂筛选

1 96孔板上做好相应标记:背景、完全活性和待测抑制剂样品

2 按下表加入试剂,进行样品预处理

内容物

空背景对照

样本背景

完全酶活性

待测抑制剂酶活性

缓冲液(Reagent C

xx微升

xx微升

xx微升

xx微升

阴性液(Reagent G

xx微升

xx微升

xx微升

——

待测抑制剂

——

xx微升

――

xx微升

用户自备的纯化酶

——

——

xx微升1毫单位)

xx微升1毫单位)

96孔板每孔总量

空背景对照

40微升)

样本背景孔

40微升)

完全活性

40微升)

待测抑制剂样品

40微升)

轻轻摇动96孔板,混匀,放进30℃培养箱里孵育30分钟。然后进行下列操作

 

3 分别移取xx微升缓冲液(Reagent C到新的96孔板的所有孔里

4 分别加入xx微升酶促液(Reagent D

5 分别加入xx微升反应液(Reagent E

6 分别加入xx微升底物液(Reagent F 

7 轻轻摇动96孔板

8 30℃温度下孵育3分钟

9 加入40微升上述预处理的待测样品

10 即刻放进30℃酶标仪检测:测读30分钟

11 抑制活性计算:





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