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点击次数:16686 发布时间:2023/11/6 21:30:28
主要用途
真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定真菌/酵母细胞中DNA结合碘化丙啶染料程度,来定量DNA含量,以进一步获取细胞周期分布状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌/酵母细胞,包括芽殖酵母、裂殖酵母等的细胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格无菌,即到即用,分辨率高,操作简捷,性能稳定。
技术背景
芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母(Schizosacchromyces pombe)是研究真核生物细胞周期的模式生物。细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过DNA结合染料,借助细胞流式仪,测定出DNA含量,根据DNA含量随着细胞周期的不同而发生变化,来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细胞术(FLOW CYTOMETRY)是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。凋亡细胞是在正常G0/G1峰细胞群前出现亚二倍体峰(sub-G1)细胞群。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
固着液(Reagent B) 毫升
抗干扰液(Reagent C) 毫升
酶解液(Reagent D) 毫升
染色液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方法
保存抗干扰液(Reagent C)、酶解液(Reagent D)和染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent E)避免光照,有效bao证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
2毫升离心管:用于细胞染色的容器
(微型)台式离心机:用于样品操作操作
培养箱或恒温水槽:用于反应孵育
细胞流式仪:用于细胞荧光分析
实验步骤
1. 准备好5 X 106的待测真菌/酵母细胞
2. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
3. 小心抽去上清液
4. 加入xx毫升清理液(Reagent A)到15毫升锥形离心管,混匀
5. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
6. 小心抽去上清液
7. 缓慢加入xx毫升预冷的固着液(Reagent B),且涡旋震荡混匀
8. 放进4℃冰箱里孵育16小时
9. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
10. 小心抽去固着液
11. 加入xx毫升清理液(Reagent A)到15毫升锥形离心管,混匀
12. 移入到2毫升离心管
13. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
14. 重复清洗一次
15. 加入xx微升抗干扰液(Reagent C),混匀
16. 放进37℃恒温水槽,孵育2至16小时
17. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
18. 加入xx微升酶解液(Reagent D),混匀
19. 放进37℃恒温水槽,孵育20分钟
20. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
21. 加入xx微升清理液(Reagent A),混匀
22. 放进微型台式离心机离心1分钟,速度为16000g
23. 小心抽去上清液
24. 加入xx微升染色液(Reagent D),混匀细胞颗粒群
25. 超声处理100瓦,30%功率,15秒
26. 在暗室里37℃培养箱里孵育30分钟
27. 移入到细胞流式仪专用测试管(可放进4℃冰箱里待测)
28. 即刻进行细胞流式仪分析:波长488nm氩离子激光出现红色荧光(或488nm激发波长,610nm散发波长),观察50000个细胞以上
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 孵育时,必须避免光照
4. 建议细胞染色完成后,即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测,不要超过1周
5. 细胞流式仪分析前,须混匀内容物,或超声处理,避免细胞成团
6. 细胞检测量不得少于10000个
7. 告知流式仪技术员有关细胞类型
8. 使用未经染色的细胞进行FSC与SSC设定,然后将染色细胞调整到未经染色细胞的水平,包括FL1、FL2、FL3的PMT
9. 建议设定:
Detector FSC E00 Gain:3
Detector FL2-A Voltage:890 Gain:2
流速:500/秒
10. 本公司提供系列细胞周期分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定荧光清晰
使用cheng诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量cheng诺”的宗旨为我们的用户提供you质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,bao证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
单组分订购信息
编号名称规格
G&VS10021.4真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒50次
G&VS10021.4A清理液(Reagent A)毫升
G&VS10021.4B固着液(Reagent B)毫升
G&VS10021.4C 抗干扰液(Reagent C)毫升
G&VS10021.4D 酶解液(Reagent D)毫升
G&VS10021.4E 染色液(Reagent E)毫升
试剂盒订购信息
产品编号 | 名称 | 规格 |
G&VS10021.1 | 通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒 | 100次 |
G&VS10021.2 | 细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒(紫外波长,无需固定和透膜处理) | 100次 |
G&VS10021.3 | 细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂盒 | 100次 |
G&VS10021.4 | 真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂盒 | 50次 |
G&VS10021.5 | 真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂盒 | 50次 |
原创作者:上海极威生物科技有限公司
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