真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

点击次数：3666 发布时间：2023/11/6 21:18:29

主要用途

真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定真菌/酵母细胞中DNA结合SYTOX绿色染料程度，来定量DNA含量，以进一步获取细胞周期分布状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌/酵母细胞，包括芽殖酵母、裂殖酵母等的细胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格无菌，即到即用，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景

芽殖酵母（Saccharomyces cerevisiae）、裂殖酵母（Schizosacchromyces pombe）是研究真核生物细胞周期的模式生物。细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过DNA结合染料，借助细胞流式仪，测定出DNA含量，根据DNA含量随着细胞周期的不同而发生变化，来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。凋亡细胞是在正常G0/G1峰细胞群前出现亚二倍体峰（sub-G1）细胞群。SYTOX绿色染料具有不受细胞数量变化、染料浓度变化、细胞形态和大小变化，以及细胞培养液不同等影响，且不易渗漏等优点。

产品内容

清理液（Reagent A）毫升

固着液（Reagent B）毫升

抗干扰液（Reagent C）毫升

酶解液（Reagent D）毫升

染色液（Reagent E）毫升

产品说明书 1份

保存方法

保存抗干扰液（Reagent C）、酶解液（Reagent D）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent E）避免光照，有效bao证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

2毫升离心管：用于细胞染色的容器

（微型）台式离心机：用于样品操作操作

培养箱或恒温水槽：用于反应孵育

细胞流式仪：用于细胞荧光分析

实验步骤

1．准备好5 X 10⁶的待测真菌/酵母细胞

2．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

3．小心抽去上清液

4．加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升锥形离心管，混匀

5．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

6．小心抽去上清液

7．缓慢加入xx毫升预冷的固着液（Reagent B），且涡旋震荡混匀

8．放进4℃冰箱里孵育16小时

9．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

10．小心抽去固着液

11．加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升锥形离心管，混匀

12．移入到2毫升离心管

13．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

14．重复清洗一次

15．加入xx微升抗干扰液（Reagent C），混匀

16．放进37℃恒温水槽，孵育2至16小时

17．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

18．加入xx微升酶解液（Reagent D），混匀

19．放进37℃恒温水槽，孵育20分钟

20．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

21．加入xx微升清理液（Reagent A），混匀

22．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g

23．小心抽去上清液

24．加入xx微升染色液（Reagent D），混匀细胞颗粒群

25．超声处理100瓦，30%功率，15秒

26．在暗室里37℃培养箱里孵育30分钟

27．移入到细胞流式仪专用测试管（可放进4℃冰箱里待测）

28．即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光出现绿色荧光（或488nm激发波长，530nm散发波长），观察50000个细胞以上

注意事项

1．本产品为50次操作

2．操作时，须戴手套

3．孵育时，必须避免光照

4．建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过1周

5．细胞流式仪分析前，须混匀内容物，或超声处理，避免细胞成团

6．细胞检测量不得少于10000个

7．告知流式仪技术员有关细胞类型

8．使用未经染色的细胞进行FSC与SSC设定，然后将染色细胞调整到未经染色细胞的水平，包括FL1、FL2、FL3的PMT

9．建议设定：

Detector FSC E00 Gain：2

Detector FL1-A Voltage：400 Gain：4

流速：500/秒

10．本公司提供系列细胞周期分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定荧光清晰

使用cheng诺

极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量cheng诺”的宗旨为我们的用户提供you质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，bao证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

G&VS10021.5 真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂盒50次

G&VS10021.5A 清理液（Reagent A）毫升

G&VS10021.5B 固着液（Reagent B）毫升

G&VS10021.5C 抗干扰液（Reagent C）毫升

G&VS10021.5D 酶解液（Reagent D）毫升

G&VS10021.5E 染色液（Reagent E）毫升

试剂盒订购信息

产品编号	名称	规格
G&VS10021.1	通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒	100次
G&VS10021.2	细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒（紫外波长，无需固定和透膜处理）	100次
G&VS10021.3	细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒	100次
G&VS10021.4	真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒	50次
G&VS10021.5	真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂盒	50次

原创作者：上海极威生物科技有限公司

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