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点击次数:1922 发布时间:2022/12/26 12:06:54
操作一、25cm2细胞培养瓶染色
实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀释液(Reagent D)到 2 毫升离心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E),混匀后,放进 37℃恒温2 水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作:
1. 小心抽去 25cm2细胞培养瓶里的培养液
2. 小心加入 xx 毫升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面
3. 小心抽去清理液
4. 小心加入 xx 毫升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面
5. 在室温下孵育 5 分钟
6. 小心抽去固定液
7. 小心加入 xx 毫升酸性液(Reagent C),清洗细胞表面
8. 小心抽去酸性液
9. 重复实验步骤 7 和 8 一次
10.小心加入 xx 毫升染色工作液,覆盖整个细胞表面
11.放进 37℃培养箱,孵育 3 小时至 16 小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发)
12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色。
操作二、24 孔细胞培养板染色
实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀释液(Reagent D)到 15 毫升锥形离心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E),混匀后,放进 37℃ 恒温水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作。
1.小心抽去 24 孔细胞培养板里的培养液
2.每孔加入 xx 微升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面
3.小心抽去每孔里的清理液
4.每孔加入 xx 微升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面
5.在室温下孵育 5 分钟
6.小心抽去固定液
7.每孔加入 xx 微升酸性液(Reagent C),清洗细胞表面
8.小心抽去酸性液
9.重复实验步骤 7 和 8 一次
10.每孔加入 xx 微升染色工作液,覆盖整个细胞表面
11.放进 37℃培养箱,孵育 3 小时至 16 小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发)
12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色
注意事项
1. 本产品为 100 次(4 个 24 孔板)或 20 次(20 个 25cm2细胞培养瓶)操作
2. 操作时,须戴手套
3. 本产品的参数:固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到zui优化
4. 使用时,避免污染母液,否则出现絮状沉淀,影响实验效果
5. 染色工作液避免光照
6. 细胞β-半乳糖苷酶活性强,孵育 3 小时即显示阳性;细胞β-半乳糖苷酶活性弱,则需要孵育 24 小时
7. 细胞染色*长孵育时间为 24 小时
8. 孵育时避免液体蒸发3
9. 本产品染色敏感,甚至对于微弱表达的酶活性仍然显色清晰;用户可以根据实际情况调整孵育时间和染色工作液浓度,使染色恰到好处
10.细胞呈现蓝色的部位为衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶活性的地方
11.染色后的细胞样品可以在 4℃冰箱里chang期保存,同样须避免光照
12.本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm 培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:
操作容器 建议处理液规格
载玻片 100 微升
载玻片培养皿 1 毫升
35mm 培养皿 1 毫升
96 孔培养板 100 微升
48 孔培养板 200 微升
24 孔培养板 500 微升
12 孔培养板 1 毫升
6 孔培养板 2 毫升
25cm2细胞培养瓶 3 毫升
13.本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定着色敏感
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS10012.1 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒 100/250 次
G&VS10012.1A 清理液(Reagent A) 500 毫升
G&VS10012.1B 固定液(Reagent B) 500 毫升
G&VS10012.1C 酸性液(Reagent C) 500 毫升
G&VS10012.1D 稀释液(Reagent D) 100 毫升
G&VS10012.1E 染色液(Reagent E) 50 毫升
产品编号 名称 规格
G&VS10021 细胞周期流式细胞分析试剂盒 100 次
G&VS10033 BrdU 标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒 10 次
G&VS10034.1 BrdU 标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 10 次
G&VS10034.2 BrdU 标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 10 次
G&VS10034.3 BrdU 标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 10 次
G&VS10034.4 BrdU 标记法载玻片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒 10 次
G&VS10034.5 BrdU 标记法组织冰冻切片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒 10 次
G&VS10034.6 BrdU 标记法组织石蜡切片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒 10 次
G&VS10012.1 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 100/250 次
G&VS10012.2 全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 10 次
G&VS10012.3 冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 50 次
G&VS10012.4 通用型组织细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 10/100 次
G&VS80056.1 细胞衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 50 次
G&VS80056.2 全组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 10 次
G&VS80056.3 冰冻切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 50 次
G&VS80056.4 石蜡切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒 50 次
G&VS30072 P16 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 5 次
G&VS30073 P21 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 5 次
G&VS20104 P16 基因表达北方杂交分析试剂盒 5 次
G&VS20105 P21 基因表达北方杂交分析试剂盒 5 次
G&VS20106.1 端粒酶活性 TRAP 电泳分析试剂盒 20 次
G&VS20106.2 端粒酶活性 TRAP 实时定量检测试剂盒 20 次
G&VS20107 hTERT 表达实时定量检测试剂盒 20 次
G&VS10037.1 细胞β-半乳糖苷酶化学发光法定量检测试剂盒 20 次
G&VS10037.2 细胞β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒 20 次
原创作者:上海极威生物科技有限公司
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