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技术文章

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒实验步骤

点击次数:1922   发布时间:2022/12/26 12:06:54

 操作一、25cm2细胞培养瓶染色

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀释液(Reagent D 2 毫升离心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E,混匀后,放进 37℃恒温2 水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作:

1 小心抽去 25cm2细胞培养瓶里的培养液

2 小心加入 xx 毫升清理液(Reagent A,清洗生长中的细胞表面

3 小心抽去清理液

4 小心加入 xx 毫升固定液(Reagent B,覆盖整个生长表面

5 在室温下孵育 5 分钟

6 小心抽去固定液

7 小心加入 xx 毫升酸性液(Reagent C,清洗细胞表面

8 小心抽去酸性液

9 重复实验步骤 7 8 一次

10.小心加入 xx 毫升染色工作液,覆盖整个细胞表面

11.放进 37℃培养箱,孵育 3 小时至 16 小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发

12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色。

 

操作二、24 孔细胞培养板染色

实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。然后移取 xx 毫升稀释液(Reagent D 15 毫升锥形离心管,加入 xx 微升染色液(Reagent E,混匀后,放进 37℃ 恒温水槽里预热,标记为染色工作液。然后进行下列操作。

1.小心抽去 24 孔细胞培养板里的培养液

2.每孔加入 xx 微升清理液(Reagent A,清洗生长中的细胞表面

3.小心抽去每孔里的清理液

4.每孔加入 xx 微升固定液(Reagent B,覆盖整个生长表面

5.在室温下孵育 5 分钟

6.小心抽去固定液

7.每孔加入 xx 微升酸性液(Reagent C,清洗细胞表面

8.小心抽去酸性液

9.重复实验步骤 7 8 一次

10.每孔加入 xx 微升染色工作液,覆盖整个细胞表面

11.放进 37℃培养箱,孵育 3 小时至 16 小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发

12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色

 

注意事项

1 本产品为 100 次(4 24 孔板)或 20 次(20 25cm2细胞培养瓶)操作

2 操作时,须戴手套

3 本产品的参数:固着剂种类和浓度、pH、生色底物的选择和浓度等达到zui

4 使用时,避免污染母液,否则出现絮状沉淀,影响实验效果

5 染色工作液避免光照

6 细胞β-半乳糖苷酶活性强,孵育 3 小时即显示阳性;细胞β-半乳糖苷酶活性弱,则需要孵育 24 小时

7 细胞染色*长孵育时间为 24 小时

8 孵育时避免液体蒸发3

9 本产品染色敏感,甚至对于微弱表达的酶活性仍然显色清晰;用户可以根据实际情况调整孵育时间和染色工作液浓度,使染色恰到好处

10.细胞呈现蓝色的部位为衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶活性的地方

11.染色后的细胞样品可以在 4℃冰箱里chang保存,同样须避免光照

12.本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm 培养皿,和各种培养孔板,须相应调整处理液:

 

操作容器              建议处理液规格

载玻片                100 微升

载玻片培养皿              1 毫升

35mm 培养皿              1 毫升

96 孔培养板              100 微升

48 孔培养板               200 微升

24 孔培养板              500 微升

12 孔培养板               1 毫升

6 孔培养板               2 毫升

25cm2细胞培养瓶           3 毫升

 

13.本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品

 

质量标准

1 本产品经鉴定性能稳定

2 本产品经鉴定着色敏感

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

订购信息

编号                      名称                             规格

G&VS10012.1         细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒   100/250

G&VS10012.1A        清理液(Reagent A                500 毫升

G&VS10012.1B         固定液(Reagent B               500 毫升

G&VS10012.1C         酸性液(Reagent C                500 毫升

G&VS10012.1D         稀释液(Reagent D                100 毫升

G&VS10012.1E           染色液(Reagent E              50 毫升

 

产品编号                   名称                                        规格

G&VS10021       细胞周期流式细胞分析试剂盒               100

G&VS10033      BrdU 标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒           10

G&VS10034.1     BrdU 标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒       10

G&VS10034.2     BrdU 标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒      10

G&VS10034.3     BrdU 标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒      10

G&VS10034.4      BrdU 标记法载玻片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒          10

G&VS10034.5     BrdU 标记法组织冰冻切片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒       10

G&VS10034.6     BrdU 标记法组织石蜡切片细胞繁殖 NBT 显色检测试剂盒       10

G&VS10012.1      细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒          100/250

G&VS10012.2      全组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒         10

G&VS10012.3      冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒        50

G&VS10012.4   通用型组织细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒     10/100

G&VS80056.1      细胞衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒               50

G&VS80056.2      全组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒        10

G&VS80056.3      冰冻切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒        50

G&VS80056.4      石蜡切片组织衰老特异性脂褐素原位染色试剂盒        50

G&VS30072       P16 蛋白表达西方杂交分析试剂盒               5

G&VS30073       P21 蛋白表达西方杂交分析试剂盒               5

G&VS20104       P16 基因表达北方杂交分析试剂盒               5

G&VS20105       P21 基因表达北方杂交分析试剂盒               5

G&VS20106.1      端粒酶活性 TRAP 电泳分析试剂盒               20

G&VS20106.2      端粒酶活性 TRAP 实时定量检测试剂盒           20

G&VS20107       hTERT 表达实时定量检测试剂盒       20

G&VS10037.1      细胞β-半乳糖苷酶化学发光法定量检测试剂盒        20

G&VS10037.2      细胞β-半乳糖苷酶比色法定量检测试剂盒               20

 

原创作者:上海极威生物科技有限公司

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