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点击次数：2283 发布时间：2022/12/26 11:57:39
一、样品预处理
1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定 100 至 500 毫克组织重量
2．（选择步骤）放进预冷的 15 毫升锥形离心管
3．（选择步骤）加入 xx 毫升清理液（Reagent A）清洗 1 次
4．即刻用刀片切碎组织
5．放进一个预冷的 15 毫升锥形离心管
6．加入预冷的 xx 毫升裂解液（Reagent B）
7．涡旋震荡 5 秒，充分混匀
8．即刻放进预冷的 DOUNCE 匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约 80 下）
9．将所有组织匀浆物移入 15 毫升锥形离心管，放进 4℃台式离心机离心 10 分钟，速度为 10000g
10．小心移出上清液到新的 15 毫升锥形离心管
11．移取 10 微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）
12．放进冰槽里备用或放入—70℃冰箱里保存
二、 测定准备
1． 设定好分光光度仪（温度为 4℃）：波长 500nm，并置零
2． 准备好 5 个 15 毫升锥形离心管，标记为 1 至 5 号管
3． 分别加入 xx 毫升预冷的清理液（Reagent A）到每个离心管
4． 移取 xx 毫升预冷的标准液（Reagent F）到 1 号管，混匀
5． 小心移取 xx 毫升 1 号管稀释的标准液（Reagent F）到 2 号管，混匀
6． 小心移取 xx 毫升 2 号管稀释的标准液（Reagent F）到 3 号管，混匀
7． 小心移取 xx 毫升 3 号管稀释的标准液（Reagent F）到 4 号管，混匀
8． 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用；标准管浓度见下表管号
清理液（Reagent A） 标准液（Reagent F） 标准精氨酸含量
1 xx 毫升 xx毫升 50微克/毫升
2 xx 毫升 xx毫升 1号管25微克/毫升
3 xx 毫升 xx毫升 2号管12.5微克/毫升
4 xx 毫升 xx毫升 3号管 6.25微克/毫升
5 xx 毫升 空对照 0
三、 标准曲线测定
1． 移取 xx 毫升上述制备的标准液（Reagent F）到新的 15 毫升锥形离心管
2． 加入 xx 微升反应液（Reagent C），混匀
3． 加入 xx 微升碱性液（Reagent D），混匀
4． 置于冰槽里孵育 10 分钟3
5． 加入 xx 毫升冰槽里预冷的显色液（Reagent E）
6． 快速枪头混匀（注意：显示砖红色）
7． 即刻移取 3 毫升到预冷的比色皿
8． 即刻放进分光光度仪检测（500nm 波长），获得吸光读数（OD）（注意：须在 10 秒之内测读）
9． 重复实验步骤 1 至 8 四次
10．实际吸光读数：标准样吸光读数－5 号管标准样吸光读数（作为空对照）
11．构建标准曲线：纵座标（Y 轴）为实际吸光读数（OD）；横座标（X 轴）为标准精氨酸含量（微克/毫升）
四、 样品测定
1． 移取 2.5 毫升上述制备的待测样品到新的 15 毫升锥形离心管
2． 加入 xx 微升反应液（Reagent C），混匀
3． 加入 xx 微升碱性液（Reagent D），混匀
4． 置于冰槽里孵育 10 分钟
5． 加入 xx 毫升冰槽里预冷的显色液（Reagent E）
6． 快速枪头混匀（注意：显示砖红色）
7． 即刻移取 3 毫升到预冷的比色皿
8． 即刻放进分光光度仪检测（500nm 波长），获得吸光读数（OD）（注意：须在 10 秒之内测读）
9． 实际吸光读数：样品吸光读数－5 号管标准样吸光读数（作为空对照）
10．根据标准曲线获得样品对应精氨酸含量（微克/毫升）
五、 计算样品实际含量
注意事项
1． 本产品为 20 次操作
2． 本产品检测范围 0 至 50 微克
3． 操作时，须戴手套
4． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全
5． 整个操作须在冰上操作
6． 样品测定避免批量一次操作，尤其是加入显色液（Reagent E）
7． 系统操作过程中，标准样品测定只需 1 次
8． 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品量
9． 用户可以使用：微克精氨酸/毫克蛋白或微克精氨酸/毫克组织等
10．本公司提供系列生化学检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定检测敏感
产品编号 名称 规格
G&VS19012.1 通用型精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.2 细胞精氨酸（arginine））含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.3 组织精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.4 血液精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.5 体液精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.6 植物精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.7 酒类精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19012.8 饮料精氨酸（arginine）含量化学比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.1 通用型精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.2 细胞精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.3 组织精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.4 血液精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.5 体液精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.6 植物精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.7 酒类精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19229.8 饮料精氨酸（arginine）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.1 通用型精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.2 细胞精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.3 组织精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.4 血液精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.5 体液精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.6 植物精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.7 酒类精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
G&VS19230.8 饮料精氨酸（arginine）含量gao效液相色谱法定量检测试剂盒 20 次
原创作者：上海极威生物科技有限公司
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王小姐
